長頸鹿藍舌病(BLU)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書 本試劑盒僅供研究使用。 檢測范圍:96T 使用目的: 本試劑盒用于測定長頸鹿血清、血漿及相關(guān)液體樣本中藍舌?。˙LU)表達。 實驗原理 本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中長頸鹿藍舌病(BLU)表達。用純化的長頸鹿藍舌?。˙LU)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中藍舌?。˙LU)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標記的藍舌病(BLU)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中長頸鹿藍舌?。˙LU)的存在與否。 長頸鹿藍舌?。˙LU)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書試劑盒組成 標本要求 1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融 2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 操作步驟 編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同) 加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻, 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 溫育:操作同3。 洗滌:操作同5。 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn))。 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。 長頸鹿藍舌?。˙LU)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書操作程序總結(jié): 計算和結(jié)果判定: 試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10 臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15 陰性判定:樣品OD值< 臨界值(CUT OFF)者為藍舌病(BLU)陰性 陽性判定:樣品OD值≥ 臨界值(CUT OFF)者為藍舌?。˙LU)陽性 長頸鹿藍舌?。˙LU)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書注意事項 1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。 2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。 3.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 5.底物請避光保存。 6.試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,使用雙波長檢測時,參考波長為630nm 7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時必須注意安全。 保存條件及有效期 1.試劑盒保存:;2-8℃。 2.有效期:6個月 |