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抗體的特異性斷定
抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的辨認(rèn)才干??贵w的特異性高,它的辨認(rèn)才干就強(qiáng)。衡量特異性一般以交叉反應(yīng)率來(lái)標(biāo)明。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)賽克制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原別離做競(jìng)賽克制曲線(xiàn),核算各自的結(jié)合率,求出各安閑IC50時(shí)的濃度,并按公式核算交叉反應(yīng)率。
假如所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),標(biāo)明這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
拓展延伸:
1. 抗體的效價(jià)斷定
不管是用于確診仍是用于醫(yī)治,制備抗體的目的都是要求較價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)紛歧。斷定效價(jià)的辦法很多,包括有試管凝集反應(yīng)、瓊脂分散試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的斷定效價(jià)的辦法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂分散試驗(yàn)來(lái)斷定。
2. 抗體的親和力斷定
抗體的親和力是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的凹凸是由抗原分子的巨細(xì)、抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原抉擇簇之間立體構(gòu)型的合適度抉擇的。有助于保持抗原抗體復(fù)合物安穩(wěn)的分子間力有氫鍵、疏水鍵、側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力、范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K標(biāo)明,K的單位是L/mol,一般K的范圍在108~1010/mol,也有多達(dá)1014/mol。抗體親和力的測(cè)定對(duì)抗體的挑選,確認(rèn)抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。