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021-65232515
產(chǎn)品型號:
所屬分類(lèi):細胞生物學(xué)實(shí)驗
產(chǎn)品時(shí)間:2023-10-13
簡(jiǎn)要描述:提供商:上海研謹生物服務(wù)名稱(chēng):流式細胞分選技術(shù)實(shí)驗服務(wù)規格:樣本 價(jià)格:30元周期:2周左右
流式細胞分選技術(shù)實(shí)驗服務(wù)
一.服務(wù)介紹
流式細胞分選技術(shù)是利用流式細胞分選儀。以高能量激光照射高速流動(dòng)狀態(tài)下被熒光色素染色的單細胞或微粒,測量其產(chǎn)生的散射光和發(fā)射熒光的強度,從而對細胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學(xué)性狀及功能狀態(tài)等進(jìn)行定性或定量檢測的一種現代細胞分析技術(shù),它可根據發(fā)射光的熒光強度和波長(cháng)將發(fā)光顆粒亞群分開(kāi)并可實(shí)現單克隆分選,能復雜樣本中的細胞進(jìn)行鑒定、分類(lèi).定量和分離,單次可同時(shí)對其中-種到四種特定細胞進(jìn)行超高速分選純化、高通量單克隆分選或細胞芯片制備。分選后的細胞能直接用于培養、移植、核酸提取、單細胞PCR擴增或原位雜交等,可進(jìn)一步進(jìn)行細胞基因、蛋白、功能水平的研究和不同細胞之間的差異化研究。硬件中樣本細胞丟棄的比例低于5%,保證樣本中目標細胞的高回收率。
二、實(shí)驗原理
當經(jīng)熒光染色或標記的單細胞懸液放入樣品管中,被高壓壓入流動(dòng)室內。流動(dòng)室內充滿(mǎn)鞘液,在鞘液的包裹和推動(dòng)下,細胞被排成單列,以-定速度從流動(dòng)室噴口噴出。在流動(dòng)室的噴口上配有一個(gè)超高頻的壓電晶體, 充電后振動(dòng),使噴出的液流斷裂為均勻的液滴,待測細胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正、負不同的電荷,當液滴流經(jīng)過(guò)帶有幾千伏的偏轉板時(shí),在高壓電場(chǎng)的作用下偏轉,落入各自的收集容器中,沒(méi)有充電的液滴落入中間的廢液容器,從而實(shí)現細胞的分離。
三、實(shí)驗流程(以分選有核紅細胞為例)
1采抗凝血10 ml。
2.密度梯度分離單個(gè)核細胞層
(1)在短中管中加入適量淋巴細胞分離液。
(2)取肝素抗凝靜脈血與等量Hank's液或RPM11640充分混勻,用滴管沿管壁緩慢疊加于分層液面上,注意保持清楚的界面。水平離心2000 rpmx20分鐘。
(3)離心后管內分為三層,上層為血漿和Hank's液, 下層主要為紅細胞和粒細胞。中層為淋巴細胞分離液,在上、中層界面處有一-以單個(gè)核細胞為主的白色云層狹窄帶,單個(gè)核細胞包括淋巴細胞和單核細胞。此外, 還含有血小板。
(4)用毛細血管插到云霧層,吸取單個(gè)核細胞。置入另-短中管中,加入5倍以上體積的Hank's液或RPMI1640, 1500rpmx10分鐘,洗滌細胞兩次。
3.免疫熒光染色
將上一步得到的單個(gè)核細胞層按1x10/1的比例加入異硫青酸(FITC)標記的CD71單克隆抗體(鼠IgM).孵育30 min后重懸于0.5 ml PBS液中進(jìn)行熒光染色。
4.FACS分選CD71陽(yáng)性細胞。
四、服務(wù)說(shuō)明
1.客戶(hù)提供血液樣本。
2.公司提供圖片和分離后的細胞。
3.實(shí)驗周期為2周左右,具體根據實(shí)驗內容而定。
五、質(zhì)量承諾
提供清晰的圖片和分選后的細胞。
從2011年開(kāi)始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域、生物醫學(xué)實(shí)驗外包及論文潤色服務(wù),協(xié)助客戶(hù)各類(lèi)實(shí)驗服務(wù)及論文潤色十余年,是客戶(hù)您值得信賴(lài)的科研合作伙伴!
如果您受時(shí)間、試驗條件等限制而無(wú)法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。
實(shí)驗代做服務(wù):
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Western Blot | 免疫組化IHC染色 | 熒光定量PCR | 動(dòng)物模型服務(wù) |
流式細胞檢測 | 免疫熒光染色 | 激光共聚焦 | DNA甲基化實(shí)驗 |
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